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BCA蛋白浓度检测试剂盒
英文名 BCA Protein Assay Kit
货号 KC3044
保存条件 室温


编号 规格 库存 目录价 网购价 数量
KC3044 500T ¥320  
概述

BCA(bicinchoninic acid)法蛋白浓度定量试剂盒是世界上常用的蛋白浓度检测方法之一。其原理是二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子(biuret reaction),

一价铜离子和独特的BCA Solution A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应.两分子的BCA螯合一个铜离子,形成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性,

吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。

说明书

酶标仪法

1. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品:取10μL BSA标准品用PBS稀释至100μL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足至20μL

3. 将样品作适当稀释(最好多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20μL96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

分光光度计法 如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下:

1. 配制工作液根据标准品和样品数量,按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂(50:1)配制成BCA工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA工作液室温24小时内稳定。

2. 稀释标准品:取100μL BSA标准品用PBS稀释至1mL(样品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/mL

3. 取八支(或者更多)5mL离心管,标上号,按下表加入试剂。

4.37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。 

注意事项

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