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无血清细胞冻存液
英文名称 Kingmorn Serum-free Cell Culture Freezing Medium
货号 KE2000
保存条件 -20℃


编号 规格 库存 目录价 网购价 数量
KE2000 50ml ¥368  
KE2000 100ml ¥568  
概述

Kingmorn无血清细胞冻存液是一款针对细胞冻存和复苏所研发的即用型细胞冻存液。该冻存液采用独特的冻存配方,包括 DMSO 在内的冻存保护剂复合物,大大降低了细胞在冻存过程中冰晶对于细胞的损伤。冻存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各种细胞营养成分,显著提高了细胞的活力和复苏率。Kingmorn无血清细胞冻存液不含牛血清,无任何动物源组分,可维持干细胞低分化状态,并且可减少各类病毒和支原体污染的风险,确保细胞冻存安全。与传统细胞冻存液相比,本产品重悬细胞后可直接冻存于-80℃,无需程序降温。如若长期保存,次日转移到液氮中即可。本产品是一款适用于贴壁细胞,悬浮细胞,干细胞的通用型细胞冻存液。
产品优势 
1. 化学成分明确,无任何外源蛋白和血清,适用于各类动物细胞株冻存。
2. 无需程序降温,细胞复苏率 90%以上。
3. 冻存细胞可直接存放于-80℃冰箱,稳定保存数年。

4. 即用型产品,4℃可稳定保存。

操作步骤 
细胞冻存 
1. 收集融合率>90%的对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于离心管中。
2. 1000 rmp 离心 5 分钟,去除离心管中的上清液,收集细胞沉淀。
3. 加入适量 Kingmorn细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为 1x106~1x107 cells/mL。枪头轻柔吹打混匀,制成细胞悬液。
4. 将离心管中的细胞悬液分装与细胞冻存管中,每管 1mL 或 1.5mL。
5. 将分装好的细胞直接冻存于-80℃冰箱中,可稳定冻存数年。
6. 如若长期保存,可在次日转移至液氮中。
细胞复苏 
1. 从-80℃冰箱或液氮中取出冻存细胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞悬液完全融化后,立即 1000 rmp 离心 5 分钟,完全除去上清。
3. 加入 1mL 细胞培养基于冻存管中,枪头轻柔吹打悬浮细胞,并转移细胞于细胞培养皿或者培养瓶中。
4. 根据细胞培养皿的大小加入适量细胞培养基后进行细胞常规培养。
保存条件 
4℃保存,有效期一年。若长不用可冻存于-20℃,有效期三年。
产品质量 
Kingmorn无血清细胞冻存液经过严格的内毒素,渗透压,pH 检测,并经过 0.1um滤膜过滤,确保产品不含有细菌,病毒,支原体等污染。

说明书

已经验证过的细胞:

Hela  293T  人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 仓鼠卵巢细胞(CHO) 小鼠胚胎成纤维细胞(MC3T3, MEF 皮肤成纤维细胞(CCC-ESF-1) 小鼠成纤维细胞(FAK+/+)人成纤维细胞 人肺细胞(HLF-a) 肺上皮细胞(BEATS-2B) 人肺成纤维细胞(MCR-5) 人肺癌细胞( A549, H460,H1299, PC9, HCC827, PC9R,H1975) 小鼠肺癌细胞(LLC) 小鼠肝细胞(AML12) 小鼠心肌细胞(HL-1) 人胃癌细胞(MKN7, SNU-1)人结肠癌细胞(KM12) 小鼠结肠癌细胞(CT-26)  人直肠癌细胞(RCM-1, SW837) 人胰腺癌细胞(Capan-1, PSN1, KP4)    Bcap-37, MCF-7, HCC1428)人喉癌细胞(TU212) 人胶质瘤细胞(SNB-19, SHG-44)人卵巢癌细胞(COV362, RKN, ES-2) 前列腺癌细胞(PC-3)人肝癌细胞(HepG2, Huh-1)人肝细胞(LO2)单核巨噬细胞(J774A.1)骨肉瘤细胞(HOS, U20S)人星形胶质细胞(HA) 人白血病细胞(K562)人B淋巴细胞  人淋巴瘤细胞(MC116, MLMA,GA- 10)间充质干细胞(HuUMSCs)小鼠胚胎干细胞(mESCs)  小鼠间充质干细胞(C3H10)  神经干细胞(mNSCs-11)人骨髓间充质干细胞(Mmmsc-11)血管内皮,神经胶质

不同细胞冻存密度推荐


细胞种类

冻存密度

贴壁肿瘤细胞

2x10 ~ 1x10 cells/mL

成纤维细胞

1~5x10 cells/mL

杂交瘤细胞

1~5x10 cells/mL

悬浮细胞

5x10 ~ 1x10 cells/mL

干细胞

1~5x10 cells/mL




细胞复苏数据


细胞系

传统血清冻存液

kingmorn TM 无血清

冻存液

日本CELLBANKER

无血清冻存液

人肺癌细胞A549

85%

94%

94%

小鼠T淋巴细胞

72%

91%

90%

人脐静脉上皮细胞

86%

94%

95%

间充质干细胞

80%

93%

94%

神经干细胞

75%

94%

95%



冻存效果

肺癌细胞HCC827和间充质干细胞MSC,-80℃冻存半年后复苏效果对比





注意事项

注意事项 
1. 由于 DMSO 对细胞有一定的损伤,冻存细胞分装后应尽快转移到-80℃冰箱,减少在室温存放时间。如遇特殊情况,可先短暂放置于 4℃并尽快转移到-80℃冰箱。
2. 对于特殊的干细胞,原代细胞或者某些难以培养的细胞系冻存时,建议对所冻存的细胞进行 1-2 周的冻存培养测试。

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